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0543-3202800ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的競爭等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。
二、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號(hào)的試劑,并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
三、樣本因素
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。其中外源性干擾因素是我們在檢測過程中可以避免也是必須避免的因素,而避免內(nèi)源性因素的干擾則主要通過選擇合適的試劑盒
四、ELISA試劑盒操作因素對ELISA結(jié)果的影響
進(jìn)口elisa試劑盒操作步驟復(fù)雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。ELISA試劑盒操作步驟有 1.加樣 2.溫育 3.洗滌 4.顯色 5.比色 這些過程中但凡一個(gè)步驟不小心都會(huì)影響到ELISA試劑盒檢測的質(zhì)量。
進(jìn)口elisa試劑盒標(biāo)本凝固不全 血液通常在采集后半小時(shí)后開始凝固,18~24h*凝固。如果在血液未凝固時(shí)即離心分離血清,則可因纖維蛋白原非特異吸附于微孔而造成假陽性結(jié)果。為了縮短標(biāo)本處理時(shí)間,可以在離心前將血液標(biāo)本置于溫箱中溫育或者采用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽┮约铀傺宓姆蛛x。